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熒光標記多糖:殼聚糖/海藻酸鈉多糖/小刺猴頭菌多糖

時間:2022-03-11 17:46:20       瀏覽:688
多糖是由10個單糖分子縮合組成的一種高分子碳水化合物,是一類分子結構復雜且龐大的糖類物質。熒光可以標記(單糖,雙糖,多糖,聚糖,瓊脂糖,寡糖等) ,多糖由于結構比較復雜,分子量較多,在結構上就具有其他物質所不具備的加工特性和流變性質。熒光素類染料又包括異硫氰酸熒光素(FITC)、羥基熒光素(FAM)等。這些染料可以與-CHO、-SH、-NH2,等活性基團結合,用于熒光探針檢測和分析多糖。況且本身缺乏發色基團和熒光基團,因此我們針對熒光標記多糖展開技術性的探究。
一.熒光標記殼聚糖

殼聚糖是多糖中的堿性多糖。殼聚糖分子結構中的氨基基團比甲殼素分子中的乙酰氨基基團反應活性更強,使得該多糖具有優異的生物學功能并能進行化學修飾反應。以熒光素異硫氰酸酯(FITC)作為標記化合物,采用紫外分光光度計在447nm下檢測標記在殼聚糖上的FITC,通過m(FITC,μg)/m(殼聚糖,g)表征殼聚糖的熒光標記效率.考察殼聚糖溶液pH值、濃度、反應時間以及殼聚糖分子量、脫乙酰度對殼聚糖熒光標記反應的影響。


二.熒光標記海藻酸鈉多糖

海洋生物多糖是從海洋、湖泊生物體內分離、純化得到的多糖。比如殼多糖、海藻酸鈉,螺旋藻多糖等。其中的熒光標記海藻酸鈉,又名褐藻酸鈉、海帶膠、褐藻膠、藻酸鹽,是由海帶中提取的天然多糖碳水化合物,由于它特殊的結構和良好的生物相容性,具有科研所需的穩定性、溶解性、粘性。海藻酸鈉已經逐漸作為化學改性的研究進展。



三.熒光標記小刺猴頭菌多糖

菌類多糖包括:脂多糖,酵母多糖,豬苓多糖,小刺猴頭菌多糖,黑木耳樹舌多糖和樹舌多糖等,小刺猴頭菌多糖和黑木耳樹舌多糖利用還原性的末端與氨基發生偶聯反應。通過紫外分光光度計、酶標儀和熒光分光光度計對標記后的真菌多糖進行掃描,并進行運算,得到該2種菌多糖的熒光物質的取代度,分別為0.79%和0.71%。同時對標記后多糖的體外穩定性進行研究,結果表明,小刺猴頭發酵浸膏多糖標記物和黑木耳發酵浸膏多糖標記物在PBS溶液、血漿及尿液中穩定性良好。

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