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DSPE-PEG-MAL磷脂基團(tuán)修飾熒光標(biāo)記多肽介導(dǎo)藥物靶向傳遞

時(shí)間:2020-10-29 11:02:21       瀏覽:1719

西安瑞禧生物科技有限公司是專業(yè)從事進(jìn)口藥用磷脂類產(chǎn)品及其相關(guān)產(chǎn)品銷售為主公司,目前經(jīng)營產(chǎn)品有進(jìn)口合成磷脂,PEG修飾磷脂,聚乙二醇衍生產(chǎn)品,鞘磷脂等產(chǎn)品。

 

肝靶向給藥系統(tǒng)(HTDDS)是可以緩釋控釋藥物的新型策略,能將藥物有效遞送到病變部位最大程度發(fā)揮治療效果降低毒副作用減少給藥次數(shù)和用藥量提高治療指數(shù)

 

HTDDS可分為主動(dòng)型和被動(dòng)型兩種:

主動(dòng)型對(duì)載體進(jìn)行一定的靶向修飾,定向地將藥物傳遞到特定的組織和細(xì)胞,常見的是利用配體-受體抗原-抗體的特異性結(jié)合發(fā)揮作用。

被動(dòng)型是采用生物相容性好、毒性低的聚合材料裝載藥物,利用體循環(huán)代謝中的“增強(qiáng)滲透保留”效應(yīng)(EPR)和肝臟網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬攝取作用發(fā)揮靶向傳遞的功能

 

利用其受體與配體特異性結(jié)合作用,可設(shè)計(jì)出HBVpreS1/2-21myr介導(dǎo),肝細(xì)胞表面NTCP受體靶向的新型肝靶向給藥系統(tǒng)。(HBVpreS1的第9-21位氨基酸是具有結(jié)合阻斷能力的高度保守序列,豆蔻酰化修飾的HBVpreS1/2-21myr是有效阻斷抑制的最短多肽)

 

步驟:

HBVpreS1/2-21myr為靶向介質(zhì),以長效循環(huán)脂質(zhì)體(LCL)為藥物載體,熒光素鈉(FS)作為熒光模式評(píng)價(jià)藥物,采用乙醇注入法制備肝細(xì)胞NTCP受體靶向的新型藥物遞送系統(tǒng)HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL。

 

1、 采用微波多肽固相合成法合成HBVpreS1多肽(2-21Aa),序列為NH2-GTNLSVPNPLGFFPDHQLDP-COOH,利用高效液相色譜(HPLC)、質(zhì)譜(MS)和離子肼質(zhì)譜(ITMS)對(duì)多肽產(chǎn)物進(jìn)行表征,進(jìn)一步進(jìn)行乙酰化和豆蔻酰化修飾得到多肽HBVpreS1/2-21myr

 

2、 分別進(jìn)行異硫氰酸熒光素(FITC)的熒光標(biāo)記二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-馬來酰亞胺(DSPE-PEG2000-Mal)磷脂基團(tuán)修飾熒光標(biāo)記的多肽HBVpreS1/2-21myr-FITC用于多肽靶向性的驗(yàn)證,磷脂基團(tuán)修飾的多肽產(chǎn)物HBVpreS1/2-21myr-PEG2000-DSPE,將作為脂質(zhì)體合成的原料與大豆磷脂、膽固醇等脂質(zhì)體配方成分混合一起,加熱并制備脂質(zhì)體。

 

3、 制備的熒光素鈉靶向脂質(zhì)體HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL和普通脂質(zhì)體FS-LCL運(yùn)用透射電子顯微鏡(TEM)觀察納米脂質(zhì)體的超微形態(tài)結(jié)構(gòu),激光粒度儀測量脂質(zhì)體粒徑大小和分布,HPLC檢測脂質(zhì)體的包封率,并對(duì)高壓均質(zhì)機(jī)處理的影響和脂質(zhì)體穩(wěn)定性做了進(jìn)一步的研究。

 

4、 通過RT-PCR和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方法構(gòu)建能夠穩(wěn)定表達(dá)NTCP的HepG2-NTCP、LO2-NTCP和HEK293-NTCP細(xì)胞,原代肝細(xì)胞活體分離的方法獲得樹鼩原代肝細(xì)胞和大鼠原代肝細(xì)胞。這些細(xì)胞將作為體外細(xì)胞靶向評(píng)價(jià)模型分析熒光多肽HBVpreS1/2-21myr-FITC熒光素鈉靶向脂質(zhì)體HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL的肝臟靶向性。將熒光多肽HBVpreS1/2-21myr-FITC與上述細(xì)胞模型孵育培養(yǎng),以流式細(xì)胞術(shù)和共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察和檢測,RT-PCR的方法檢測轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中NTCP的表達(dá),從蛋白水平和mRNA水平驗(yàn)證細(xì)胞模型構(gòu)建成功。

 

5、 將包裹有熒光素鈉的靶向納米脂質(zhì)體HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL、對(duì)照的普通脂質(zhì)體組FS-LCL和熒光素鈉水溶液FS,分別與上述細(xì)胞進(jìn)行孵育培養(yǎng),以流式細(xì)胞技術(shù)和激光共聚焦顯微鏡分析納米脂質(zhì)體的肝靶向性。

 

 

文本關(guān)鍵詞定制供應(yīng):

PreS1多肽(2-21 Aa)介導(dǎo)肝臟靶向脂質(zhì)體

HBVpreS1多肽(2-21Aa)

乙酰化和豆蔻酰化修飾多肽

異硫氰酸熒光素(FITC)的熒光標(biāo)記多肽

二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-馬來酰亞胺

DSPE-PEG2000-Mal

磷脂基團(tuán)修飾多肽

熒光標(biāo)記的多肽HBVpreS1/2-21myr-FITC

磷脂基團(tuán)修飾的多肽HBVpreS1/2-21myr-PEG2000-DSPE

多肽-PEG2000-DSPE

熒光素鈉靶向脂質(zhì)體HBVpreS1/2-21myr-FS-LCL

2-21Aa-FITC

2-21Aa--PEG2000-DSPE

納米脂質(zhì)體

 

定制磷脂基團(tuán)修飾多肽:

DSPE-PEG2000-cRGD, 多肽序列:c(RGDyk)

磷脂-PEG-多肽GE11(腫瘤細(xì)胞表皮生長因子肽)

磷脂-PEG-cRGD環(huán)肽

磷脂-PEG-奧曲肽(OTC)

磷脂-PEG-細(xì)胞穿膜肽

磷脂-PEG-聚類肽

磷脂-PEG-糖肽

磷脂-PEG-磷酸肽

磷脂-PEG-藥物肽

DSPE-PEG-Angiopep 多肽修飾聚乙二醇PE磷脂

DSPE-PEG2000-多肽GNQWFI

DSPE-PEG-cKNGRE 多肽磷脂

DSPE-PEG-Lanreotide 磷脂-PEG-蘭瑞肽

DSPE-PEG(3400)-CTT2 磷脂PEG抗癌靶向多肽

anti-HER2-scFv-PEG-DSPE 抗體聚乙二醇磷脂

DSPE-PEG-octreotide 磷脂聚乙二醇奧曲肽

DSPE-PEG-SP94

DSPE-PEG(2000)-TMSP

DSPE-PEG-cKNGRE 多肽磷脂

DSPE-PEG2000-CCK8 靶向肽聚乙二醇磷脂

DSPE-PEG-BTC

DSPE-PEG2000-TP/psCPP

DSPE-PEG5000-NGR

序號(hào) 新聞標(biāo)題 瀏覽次數(shù) 作者 發(fā)布時(shí)間
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