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合成PLL coating Fe3O4 nanoparticles(30nm)納米材料的3個方法
瑞禧生物小編分享:合成PLL coating Fe3O4 nanoparticles(30nm)納米材料的3個方法:
1.制備過程:
按n(Fe2+):n(Fe3+)=1:2的 FeCl2-4H2O和 FeCl3·6H2O混合溶液中,加入物質的量為n (Fe2+)的0.1-1倍的Na3Cit·2H2O;劇烈攪拌下用0.1M NaOH調節溶液,使其pH=11,并持續攪拌30min,然后將混合溶液在80℃油浴中反應2h,得到沉淀,抽濾后,用去離子水洗滌5次后,在室溫條件下通過真空干燥得到磁性Fe3O4納米顆粒。
然后準確稱取3 mg 磁性Fe3O4溶于 3 mL MES (0.1M) pH5.8緩沖溶液中,超聲分散;稱10 mg NHS,9 mg EDC加入上述溶液中,超聲分散30 min,加入420uL( 1 ug/uL)PLL,搖勻反應6 h,用去離子水洗滌3次,真空干燥得到磁性F3O4-PLL納米顆粒。
利用了檸檬酸鈉作為表面修飾劑,使得Fe3O4表面修飾上大量羧基,增大了其空間位阻和表面靜電排斥力,增加其穩定性和分散性。然后采用層層自組裝技術,將聚賴氨酸通過酰胺鍵與羧基化的Fe3O4聯結。
取10 ul SPIONS,置于無菌Ep管中。將裝有SPIONS的無菌Ep管置于超凈工作臺上,打開Ep管蓋,在紫外燈下照30 min以上(以后每次打開Ep管均在無菌環境下)。
向裝有SPIONS的無菌Ep管中加入1.0 ml PBS溶液,封好管口,冰水浴超聲分散15 min至溶液中無肉眼可見顆粒,12000 rpm離心10 min,棄上清。沉淀重懸于1 ml PBS溶液中,冰水浴超聲分散20 min,加入3.0 mg PLL干粉,充分混勻后再離心,棄上清,沉淀重懸于適量PBS溶液中,冰水浴超聲充分分散后4℃儲存備用。
獲得密度均勻的SPIONSPLL復合物懸浮溶液。懸液4℃放置24 h后,觀察納米微粒的沉淀現象,SPIONS--PLL由于重力作用沉至管體中間位置,仍為懸浮狀態,輕輕晃動SPIONS—PLL又均勻懸浮于液體中。
3.制備過程:
將質量濃度500 mg/L葡聚糖T-10溶解于定量的蒸餾水中,待其溶解后,加入質量濃度33 mg/L氯化鐵(FeCl3.6H2O)、質量濃度12 mg/L氯化亞鐵(FeCl2·4H2O),充分溶解后,于60℃水浴中逐滴加入定量的氨水,使pH為12,攪拌下反應1 h后,將反應產物置于–鐵–硼稀土強磁塊上,磁性分離,用蒸餾水和無水乙醇反復洗滌,用生理鹽水重懸,濾膜過濾Sterilization,得到外包葡聚糖的磁性Fe3O4將等質量的多聚賴氨酸與之混合,用超聲波分散Ih左右,將反應產物置于物-鐵–硼稀土強磁塊上靜置3d,磁性分離,用生理鹽水重懸,再用濾膜過濾Sterilization,得到PLL-IONP。
知識拓展:
Poly-L-lysine(PLL)是一種多聚賴氨酸,通常用作生物實驗室中的涂層劑、細胞培養基質以及在生物醫學領域中作為藥物傳遞載體。PLL的生產通常可以通過以下三種方法:
化學合成法: 這是一種常用的PLL生產方法。化學合成法通常從L-賴氨酸(L-lysine)出發,經過一系列化學反應,合成出具有特定長度的PLL。合成過程中,可以通過控制反應條件和反應時間來控制PLL的分子量和長度。
酶法合成法: 酶法合成是一種生物合成PLL的方法。通過使用特定的酶,例如蛋白酶(protease),可以催化L-賴氨酸的聚合,從而生成PLL。這種方法相對溫和,不需要使用高溫或高壓條件,因此可以得到較為純凈的PLL。
基因工程法: 基因工程法是一種現代生物技術方法,可以通過轉基因技術在微生物(如大腸桿菌)中表達和合成PLL。這種方法通常涉及將PLL基因導入到宿主微生物中,使其在宿主細胞內合成PLL。之后,可以通過培養、提取和純化的步驟來得到目標產品。這種方法具有高度的可控性和可調性,可以實現定制化的PLL生產。
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