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瑞禧-陽離子脂質體的構成及制備

時間:2023-04-26 13:53:05       瀏覽:294

陽離子脂質體的構成:

將細胞轉染素制備成陽離子脂質體通常需要中性或兼性輔助脂與之結合,如二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、磷脂酰膽堿(PC),這些中性磷脂起到穩定雙層膜和降低陽性成分毒性的作用,同時提供陽性脂質的細胞滲透功能。DOPE是應用最廣的中性磷脂,它具有很強的細胞膜去穩定化作用,在陽離子脂質體介導的基因轉染中起到關鍵作用。

 

陽離子脂質體的制備:

通常是光將細胞轉染素和中性脂質溶解混合,經反相蒸發后加入水或含水的混合溶液,再用漩渦和咸超聲振蕩的方式來制成懸液。用 DOTMA類似體制備的陽離子脂質體一般是等摩爾比的細胞轉染素和 DOE在室溫下混合,用漩渦振蕩制成較大的多層膜囊泡,然后用超聲振蕩形成適于基因轉染的小的單層膜囊泡。但陽離子脂質體Lipo-fectAM NE中 DOSPA: DOPE為 3: 1,而用DOTAP制備的脂質體不加中性脂質也有轉染活性。膽固醇衍生物類脂質體通常也是細胞轉染素與 DOPE按不同摩爾比率制成,但由亞精胺膽固醇構成的Transfectall卻不含輔助脂。研究表明用油水乳劑制備陽離子脂質體能獲得更好的穩定性,可減少血清對脂質體的抑制作用。用凍融薄膜法制備的陽離子脂質體被認為有較好的包埋率和較大的脂質體顆粒。


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