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瑞禧發射波長615nm氨基化NH2-CdSe/ZnS量子點偶聯BPA半抗原
今天瑞禧生物小編分享氨基化量子點偶聯抗原的過程,一起看看吧:
活性酯的制備:
取15mmolL的 BPA半抗原160uL,再加入12.3mg/mL 的NHS溶液45L,用漩渦混合器混勻后加入255uLEDC (5mg/mL),用DMF定容到1mL,放置于靜音混合器上常溫反應12小時以上。通過薄層層析觀察活性酯的生成。投料摩爾比為BPA半抗原:NHS:EDC=1:2:3.1.標記反應:將50uLQDs(濃度為8umoVL)溶解于340uL的硼酸鹽緩沖液,再加入80uL的活性酯,放置于靜音混合器上常溫反應12小時以上。投料摩爾比為活性酯:QDs=480:1.
標記物的純化:
在4℃,6000r/min條件下,每次1小時。用截留量為5K的超濾離心管離心8次,每次離心前加入1.9mL的硼酸鹽緩沖液(含0.02%NaNg),用含0.02%NaN,硼酸鹽緩沖液做空白,通過紫外掃描觀察直到BPA半抗原(276nm)無吸收峰為止。離心結束后,用QDs保存液定容到400uL,此時量子點標記物的濃度為1umolL,放入到4℃保存。
從熒光光譜圖看出,量子點標記物的發射波長窄而且對稱,此時標記物的z大發射波長為615nm。
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