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瑞禧定制實心球狀CdSe/ZnS/硫量子點QD-AFP-Ab/CPV VLP標記抗體
量子點(quantum dots,QDs),又稱為半導體納米粒子,是納米級別的無機熒光染料。今天瑞禧生物小編分享量子點標記蛋白,一起看看吧:
將純化后的 CPV-VP2蛋白溶液(測定OD280=2.0,蛋白濃度為2mg/ml)和修飾后的 QDs(MPA-QD)(使用前將量子點超聲 15min)按體積比5:1 (500 ulCPV-VP2蛋白溶液內加入100 ul MPA-QD溶液)加入透析袋(透析袋孔徑為10KDa)內,同時按當前溶液體積比 100:1加入 SUMO蛋白酶切酶(切除蛋白His標簽)混勻后置入組裝緩沖液( 40mM Tris-Hcl、150 mM NaCl、1mM CaCl2.PH=7.0)中4℃過夜酶切,未包被的量子點用透析的方法除去。通過CPV衣殼蛋白VP2自組裝的特性將修飾后的QDs包裝入VLP蛋白內。
圖 A圖中所顯示的是CPV顆粒電鏡圖,與天然CPV粒子不同的是,VLP不具有核子,從而在電鏡下看到的是空心粒子。圖B圖中所示的是CPVVLP-QDs復合物的電鏡圖,與圖A不同的是B圖中所顯示的是具有實心的粒子,此粒子因為將QDs作為了核子包裹入其衣殼內部,從而在形態上接近于天然bd粒子。
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