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NHS活化酯 (N-羥基琥珀酰亞胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester)是生物標記反應中最常用的活化基團。它活化磺化Cy3分子中的羧基,讓它可以和目標生物分子上的胺基(伯胺或者仲胺)反應生成穩定的酰胺鍵,從而把染料分子標記到生物大分子上。由于游離胺基是蛋白,抗體,多肽表面的常見官能團(來自于賴胺酸側鏈),磺化Cy3-NHS可以和它們直接反應。核酸分子中天然不帶游離胺基,只有胺基修飾過的RNA或者DNA才可以和磺化Cy3-NHS反應。
Cy3 NHS酯是標記生物分子氨基的活性染料,此試劑可標記溶解蛋白,多肽和寡核苷酸/DNA。對于比較敏感的蛋白請選擇無需任何共溶劑的,可溶于水的磺酸基-Cy3 NHS酯。
外觀:紅色粉末
分子量:590.15
質譜分析M+增量:474.2
分子式:C34H40ClN3O4
溶解性:溶于有機溶劑(DMF,DMSO,二氯甲烷),不溶于水
標記對象:氨基
激發波長:555nm
激發波長下的消光系數:150000Lmol-1cm-1
發射波長:570nm
熒光量子產率:0.31
供應商:西安瑞禧生物科技有限公司
存儲:-20℃。
注意事項
1)NHS ester基團對濕度非常敏感,務必干燥保存產品。使用前產品需放到室溫回溫至少20min。
2)NHS ester基團的水解發生在水溶性緩沖體系屬于競爭性反應。對蛋白/多肽(濃度:1-1mg/ml)伯胺的連接反應建議在pH 7-9范圍內進行。使用不含氨基的緩沖體系,pH 7-9。比如100 mM 磷酸鈉,150 mM 氯化鈉, pH7.5; 100mM Hepes, pH 7.5。100 mM 碳酸鈉/碳酸氫鈉, pH 8-9;或100mM硼酸緩沖液, pH 8-9。
3)不要使用含伯胺的任何緩沖液,比如Tris,甘氨酸。
4)為了安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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