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產品概述

Cy5/Cy5.5/Cy7偶聯試劑盒可以通過抗體/蛋白上的伯胺基團（如賴氨酸），簡單、快速地實現抗體/蛋白與 Cy5/Cy5.5/Cy7的共價偶聯。

此為通用型試劑盒，適合各種分子量不一致的抗體/蛋白偶聯Cy5/Cy5.5/Cy7。偶聯在30 分鐘內即可完成，偶聯效率可達70%左右。使用超濾管純化，可快速去除多余Cy5/Cy5.5/Cy7，且不會損失抗體/蛋白。 

優點

1、操作便捷，反應快速。

2、偶聯效率高，且延長反應時間不影響偶聯效率。

3、此為通用型試劑盒，適合各種分子量不一致的抗體/蛋白偶聯Cy5/Cy5.5/Cy7。

4、實驗結果重現性好。     

偶聯反應示意圖

Cy5/Cy5.5/Cy7偶聯試劑盒使用說明

Cy5/Cy5.5/Cy7偶聯試劑盒可以通過抗體/蛋白上的伯胺基團（如賴氨酸），簡單、快速地實現抗體/蛋白與Cy5/Cy5.5/Cy7的共價偶聯。此為通用型試劑盒，適合各種分子量不一致的抗體/蛋白偶聯Cy5/Cy5.5/Cy7。

偶聯在30分鐘內即可完成，偶聯效率可達70%左右。使用超濾管純化，可快速去除多余Cy5/Cy5.5/Cy7，且不會損失抗體/蛋白。    

 實驗步驟

  1. 取1~10 mg抗體/蛋白溶解于1 mL純水中，加入100 μL Coupling Reagent，混合均勻。

(以下步驟按標記1 mg抗體/蛋白為例)。

  2. 根據Cy5/Cy5.5/Cy7標記需求量，稱取0.1 ~1 mg Cy5/Cy5.5/Cy7mix固體加至第1步溶液，充分混合溶解。

  注：(a) 若Cy5/Cy5.5/Cy7mix用量超出1 mg，可能導致熒光標記過量，引起熒光部分淬滅;

(b) 若低于1 mg的Cy5/Cy5.5/Cy7mix難以稱取，可先取1 mg Cy5/Cy5.5/Cy7mix固體溶解于100 μL Cy5/Cy5.5/Cy7 mix溶解液，再按需取Cy5/Cy5.5/Cy7mix溶液加至第1步溶液。由于Cy5/Cy5.5/Cy7mix溶解后易分解，溶液須盡快使用且不可保存。

3. 室溫避光反應30 min，延長反應時間不影響偶聯效率。

4. 將反應液轉移至超濾管，10000rpm超濾5 min，即可除去未反應的Cy5/Cy5.5/Cy7和無機鹽成分，為提高純度，可加入純水重懸抗體/蛋白，重復超濾1~2次。

5. 使用純水或PBS將超濾管截留下的抗體/蛋白重懸，即得到Cy5/Cy5.5/Cy7標記的抗體/蛋白溶液。

注意事項

1. 偶聯前抗體/蛋白中可能含有成分，建議低于以下比例:

2. 偶聯后的抗體/蛋白應避光保存。通常在4 ℃下可保存6~12個月。如需保存更長時間，可加入冷凍保護劑如50%甘油，在-20℃保存。    

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