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蛋白質與原卟啉IX及復合物發光機理的研究

時間:2021-10-11 14:07:45       瀏覽:492
原卟啉(Protoporphyrin X)與蛋白質結合物的吸收、熒光的激發、發射光諾,在光作用下,其可見區發光(入mar 635 nm左右)與嚇啉有關,而紫外區發光(入naz 422 nm左右)與蛋白質的色氨酸殘基有關,其光諾特性與臨床診斷選擇的癌固有熒光特征峰基本相符。該研究結果為探討癌的發光機理積累了有益資料。

實驗:
材料:原嚇啉二鈉鹽(Protoporphyrin Naz,簡稱為PP),經乙醚重結晶,牛血m白蛋白(Bovine Serum Albumin,簡稱為BSA)。原離子水經重蒸后使用。實驗在室溫中進行。
儀器:HITACHI MPF-4熒光分光光度計,SHIMADZU紫外可見分光光度計。

制備方法∶蛋白質與卟啉結合物的制備,分離和純化是參照william T.等人方法(3,按牛血清白蛋白與原嚇啉Ⅳ克分子1:5配制,在37℃保溫30min,蛋白質與原葉啉X結合物分離是用聚丙烯酰胺電泳中進行的{3,然后借紫外燈光從凝膠電泳分離帶中提取BSA-PP帶,從凝膠帶分離提取BSA-PP,收集提取液并對p 7.2PBS透析,用pH 7.2PBS配制BSA-PP測試液,使其濃度在280 nm處測得光密度(OD)0.40左右。


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