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DOTA是一種十二元四氮雜大環配體，本質上是環楞胺中四個氮上的氫被乙酸基取代的產物. 實驗選取DOTA為雙功能螯合劑,采用戊二醛法將重金屬鉛離子分別與載體蛋白BSA和OVA偶聯制備免疫原和包被原,經測定其結合比分別為13:1和9:1.用合成的免疫原免疫制備兔多克隆抗體并建立間接競爭ELISA(ic-ELISA),結果顯示,其icELISA線性回歸方程為y=12.014lnx-13.249(R2=0.9951),IC50和IC20分別為193.4 ng/mL和15.9 ng/mL,具有較好的檢測靈敏度.交叉反應試驗顯示,除了與鎘交叉反應率達20.4%外,該抗體與其它重金屬鐵,鉛和鋅等的交叉反應率均小于6.4%,特異性較好.本研究成功制備鑒定了重金屬鉛人工抗原并制備了兔多克隆抗體.靈敏度和特異性分析表明:用雜環類雙功能螯合劑制備的重金屬人工抗原的制備效果較好,為下一步開展該雜環類雙功能螯合劑在重金屬快速檢測技術中的研究奠定基礎.

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