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熒光抗體技術,用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標本固定于玻片表面,滴加已知熒光抗體后再以緩沖液沖洗,干燥后于熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體復合物; 陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不能與抗原結合,被沖冼掉)。該技術具有簡單、特異性高、敏感性低、同時檢測多種抗原時較復雜等特點。
1. 直接法
直接法是熒光抗體技術最簡單、最基本的方法。它通過標記抗體直接與相應抗原(待檢抗原標本)結合,來鑒定未知抗原。
其優(yōu)點為:
①由于在反應中只有兩種因子參與,結果判斷較簡單;
②特異性強,與其他抗原交叉染色較少;
③操作步驟少,方法簡便、省時。
其缺點有;
①敏感性較差;
②一種標記抗體只能鑒定一種抗原;
③不能用于鑒定未知抗體。
2. 間接法
間接法是目前最常用的方法。首先用已知未標記的抗體(第一抗體)與待檢抗原反應或用未知抗體與已知抗原反應,反應一定時間后,洗去未結合的抗體,再與標記的抗免疫球蛋白抗體(二抗)反應。在第一步反應中,若抗原抗體發(fā)生了反應,則抗體被固定在標本上,那么第二步反應中標記的抗體(二抗)必然與第一步反應形成的抗原抗體復合物中的抗體發(fā)生反應,這樣就可以通過二抗的示蹤,對標本中未知抗原或抗體進行鑒定。
其優(yōu)點為;
①敏感性較高,是直接法的5-10倍;
②用一種標記的抗體,就能與一種以上的相應的抗體或抗原配合鑒定多種未知的抗原或抗體;
③既能鑒定未知抗原,又能鑒定未知抗體。
其缺點有
①在反應中有多種因子參與,容易產生非特異性染色,結果判斷有時較困難;
②操作步驟多,費時。
3. 雙標記法
雙標記法是用兩種熒光素(常用FITC和PE)分別標記特異性不同的抗體,用于檢測同一標本中的不同抗原。此法常用于細胞表面抗原和受體的研究。
熒光標記抗體定制介紹:
熒光標記抗體Rituximab
熒光標記生物素化抗GPC3抗體
熒光標記CD62P單抗
熒光標記CD42a單克隆抗體
熒光標記抗CD4抗體
熒光標記的PCT單克隆抗體
熒光標記抗CD8抗體
熒光標記抗CD3抗體
熒光標記靶向CAIX的抗體
熒光標記抗CD69單克隆抗體/抗CD69-PerC
熒光標記到單克隆抗體anti-VEGF165-USPIO
熒光標記二抗孵育
熒光標記hu3D3/cSA 抗人肺癌單域抗體hu3D3
熒光標記的抗CD63抗體
熒光標記P-糖蛋白抗原P-glycoprotein Cy3-(P-GP)
熒光標記鼠抗人MRP1單克隆抗體 Cy3-鼠抗人MRP1抗體
熒光標記重組人源化單克隆抗體SM09 Cy3-SM09
熒光標記抗馬-干擾素單克隆抗體
熒光標記抗馬IFN-γ單克隆抗體(SB10)
熒光標記抗牛IFN-γ單克隆抗體(CC302)
熒光標記萊克多巴胺單克隆抗體(RAC McAb) Cy3-RAC McAb
熒光標記ICAM-1單克隆抗體 熒光標記ICAM-1抗體
熒光標記抗SEA抗體 抗葡萄球菌腸毒素A抗體
熒光標記抗CD15抗體 鼠單克隆抗體
熒光標記PD-1抗原
熒光標記CD45RA新克隆ZCH-6-3A4(簡稱3A4)單克隆抗體
熒光標記全抗原(AgSN)
熒光標記P-選擇素單克隆抗體 P-選擇素是一種膜糖蛋白
熒光標記單克隆抗體CD61 Cy3-CD61
熒光標記抗ICAM-1抗體
熒光標記抗驢
熒光標記抗綿羊/山羊
熒光標記抗雞
熒光標記抗馬
熒光標記抗兔
熒光標記抗狗
熒光標記抗牛
熒光標記的山羊抗大鼠IgG
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