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ER-Tracker Red是一種具有細胞膜通透性的內質網紅色熒光探針,對內質網有高度選擇性,可以用于活細胞內質網特異性熒光染色。傳統的DiOC6(3)對ER染色的同時也對細胞有一定的毒性,而ER-Tracker Red對于細胞的毒性極低。ER-Tracker Red呈紅色熒光,檢測時的激發波長為587nm,發射波長為615nm。
ER-Tracker Red(1mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以20~25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。對于微量的液體,每次使用前先離心數秒鐘,使液體充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
需自備蓋玻片和載玻片。
格列本脲的藥理學活性可能會影響內質網的一些功能;某些特殊細胞中磺脲類受體的可變表達可能會導致非內質網特異性染色。
ER-Tracker Red適用于活細胞內質網的熒光染色,但不適合用于固定細胞內質網的熒光染色。如果經ER-Tracker Red染色后的細胞需要進行固定操作,使用4%多聚甲醛在37℃固定2分鐘。
ER-Tracker Red染色后的細胞不能用Triton X-100通透,Triton X-100通透處理會導致ER-Tracker Red的熒光染色消失。
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